invitrogen lipo2000轉染試劑 資深用戶操作經(jīng)驗總結(難能可貴)
發(fā)布時間:2013-7-8
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lipo2000是各大實驗室,科學院,技術實驗室最常用的轉染試劑,小小的試劑,價格不菲,經(jīng)常聽到客戶說嚴格按照說明書來操作,還會出現(xiàn)這樣或者那樣的問題。客戶經(jīng)常抱怨東西貴,還做不出好效果。我公司請到經(jīng)驗豐富的專業(yè)人士,幫我們總結了使用lipo2000的一些小技巧,這可是資深人士的經(jīng)驗之談。希望對廣大科研使用者有所幫助! 

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Lipo2000

1. Lipo2000的保存:4℃保存和運輸

2. Lipo2000的活性:由于Lipo2000是生物蛋白,在4℃保存和運輸,所以就算是同一個批號的Lipo2000,只有在剛出廠分裝時活性才是相同的。經(jīng)過供應商的保存、運輸(運輸?shù)臏囟瓤刂聘鞑幌嗤?,其活性將有細微的變化?span lang="EN-US">

3. Lipo2000的優(yōu)化:

3.1 由于每一管Lipo2000的活性都不太相同,其實就算是同一管,使用的時間長了,后期的活性跟剛開始用時也不太一樣,所以在拿到一管新的Lipo2000時,一定要做一下活性優(yōu)化;

3.3 如果一直使用Lipo2000做實驗,優(yōu)化的步驟可以簡化:假設之前轉化時每孔一直用4ul Lipo2000,那么優(yōu)化的步驟可以簡化為只用5個孔,每個孔中Lipo2000用量分別為3ul, 3.5ul, 4ul, 4.5ul, 5ul,其他條件不變,看那個

Lipo2000的用量結果最好,接下來的實驗就用優(yōu)化的用量。

4. Lipo2000的使用:

4.1 使用前將整管的Lipo2000混勻,分裝,最好分成100ul/管;

4.2 實驗前,將分裝好的100ul Lipo2000和質粒DNA(或RNA)放到實驗臺上室溫平衡,不需要冰上保存;

4.3 Opti-MEM培養(yǎng)基放到水浴鍋中37℃平衡;

4.4 按照說明書進行轉染,注意控制好每一步操作的時間。

 

5. 切記并不是Lipo2000的用量越多越好,實際上,Lipo2000加多了,毒性會增加,細胞會死亡,轉化效率會大幅降低。

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