一、細(xì)胞因子的概念和分類
細(xì)胞因子(Cytokine)是由免疫細(xì)胞或非免疫細(xì)胞合成和分泌的小分子多肽。天然免疫和特異性免疫的效應(yīng)階段大部分是由細(xì)胞因子介導(dǎo)的。細(xì)胞因子作為免疫活性細(xì)胞間相互作用的介質(zhì)(mediator),對(duì)免疫應(yīng)答的發(fā)生、調(diào)節(jié)及效應(yīng)等均起重要作用。
包括:淋巴因子(Lymphokine)、單核因子(Monokine)、白細(xì)胞介素(IL)、集落刺激因子(CSF)、干擾素(IFN)、腫瘤壞死因子(TNF)、趨化因子(Chemokine)、TGFb(Transforminggrowth factor b)超家族、生長因子(Growth factor)。
二、細(xì)胞因子的產(chǎn)生
1、由活化的淋巴細(xì)胞(特別是Th1、Th2細(xì)胞)、活化的單核巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生,
2、由腫瘤細(xì)胞,如Jurkat細(xì)胞、VWHI-3細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞等產(chǎn)生,
3、由通過基因工程技術(shù)在工程細(xì)胞生產(chǎn)重組細(xì)胞因子。自身產(chǎn)生的細(xì)胞因子是極少的,所以科研用的細(xì)胞因子絕大多數(shù)都是通過此途徑來的,而且為了保持其穩(wěn)定性和方便運(yùn)輸,往往制作成凍干粉狀。
三、細(xì)胞因子的功能
細(xì)胞因子常與靶細(xì)胞表面特異性受體結(jié)合而發(fā)揮效應(yīng),相當(dāng)于半抗原,所以也具有種屬特異性。
1、作為天然免疫的介質(zhì),具有此種功能的細(xì)胞因子是由感染性因子刺激單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的;
2、參與淋巴細(xì)胞的活化、生長和分化,這些細(xì)胞因子是在T細(xì)胞對(duì)特異性抗原識(shí)別的過程種誘發(fā)產(chǎn)生的;
3、在免疫-炎癥反應(yīng)中,對(duì)炎性細(xì)胞起調(diào)節(jié)作用,細(xì)胞因子激活T細(xì)胞在特異性抗原識(shí)別過程中誘發(fā)產(chǎn)生的非特異性炎性細(xì)胞;
4、刺激未成熟白細(xì)胞的生長和分化,此種細(xì)胞因子是由被激活的淋巴細(xì)胞和其他細(xì)胞產(chǎn)生的。一種細(xì)胞因子可能表現(xiàn)出一種以上的生物學(xué)功能。
四、細(xì)胞因子的應(yīng)用
1、在臨床上的應(yīng)用:重組細(xì)胞因子用于治療各種疾病,如腫瘤、感染、造血功能障礙等;細(xì)胞因子抑制劑用于治療炎癥、自身免疫病、移植排斥、休克等;細(xì)胞因子檢測(cè)用于判斷機(jī)體免疫功能,進(jìn)行疾病的輔助診斷,判斷病程,預(yù)后,評(píng)價(jià)治療效果;重組細(xì)胞因子可作為佐劑與疫苗共用,預(yù)防感染性疾?。患?xì)胞因子基因治療。
2、有些細(xì)胞因子是體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)必須的營養(yǎng)物質(zhì),尤其是目前興起無血清培養(yǎng)基使細(xì)胞因子得到更廣泛的應(yīng)用。
五、重組細(xì)胞因子的使用
1、因?yàn)樗淖饔迷?,使用時(shí)注意種屬特異性。
2、重組:建議在啟用前要把裝有凍干粉的小瓶簡單離心一下。重組在無菌蒸餾水或含0.1 %BSA緩沖水溶液中進(jìn)行,以濃度為0.1-1.0毫克/毫升為宜,然后再分成若干份并保存于-20度以下,需要時(shí)再以適當(dāng)?shù)木彌_液進(jìn)一步稀釋。
3、貯存:凍干制劑穩(wěn)定在2-8度,若長期保存最好以凍干粉的形式保存于-20度。重組后,在2-8 C可以保存一周。為保持更大的穩(wěn)定性,把重組物分成若干份并保存在-20度到-70度,并避免重復(fù)凍結(jié)/解凍的循環(huán)。