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發(fā)布時(shí)間:2015/3/5
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Ultra-Lab\ORCUGEN耗材產(chǎn)品品質(zhì)說(shuō)明

一、品質(zhì)描述
       1、 吸頭的制做,選用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T186742002最高等級(jí)優(yōu)等品的聚丙烯材料制成,化學(xué)穩(wěn)定性好,機(jī)械強(qiáng)度高,無(wú)痕量金屬殘留,對(duì)細(xì)胞和組織樣品不會(huì)產(chǎn)生有害影響。

       2、 經(jīng)充分的表面硅化處理,吸頭壁對(duì)液體和樣品的吸附性顯著降低,使液體掛壁量平均減少80-85%。

       3、 密閉性好、應(yīng)用范圍廣。如:離心管的密閉性達(dá)到了進(jìn)口的同類耗材水平,且可用于低溫離心。

       4、 經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)凈化處理,無(wú)RNase/DNase活性,無(wú)熱原,無(wú)DNA污染。

       5、 已進(jìn)行高溫/壓滅菌處理。 

二、 硅化耗材的介紹:

        耗材的表面硅化處理能很大程度的降低其表面的吸附力,而耗材表面吸附力的降低能直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果和進(jìn)程,還可以節(jié)省試劑,降低實(shí)驗(yàn)成本。

        常用的塑料耗材其管壁表面看起來(lái)十分光滑,但對(duì)于水分子和溶質(zhì)分子來(lái)說(shuō)卻完全不是這樣。下圖是不同品質(zhì)吸頭內(nèi)壁的顯微圖像,從中我們可以清楚地看到其各自管壁表面的結(jié)構(gòu)。 

1顯示的是普通吸頭內(nèi)壁表面:50×顯微鏡下清晰可見(jiàn)深淺大小不一的凹坑,且邊緣粗糙;放大到500倍時(shí)可見(jiàn)很多較小的孔洞,大小深淺不一而足,有的甚至貫穿內(nèi)外壁;放大5000倍時(shí)則可以清楚地看到管壁表面大量的毛刺和細(xì)絲,它們長(zhǎng)短不一,或似草木獨(dú)立或糾結(jié)成團(tuán)。

        圖2顯示的是經(jīng)過(guò)硅化處理之后的低吸附吸頭內(nèi)壁表面:可以看到,小的凹坑和孔洞都已被填平,滿布毛刺細(xì)絲的表面變得光滑了,剩下的少數(shù)一些大凹坑明顯變淺,且邊緣光滑清楚了吸頭內(nèi)壁的結(jié)構(gòu)之后,我們常見(jiàn)的一些實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象也就容易解釋了。例如:

1)液體掛壁:液體從如此粗糙的表面經(jīng)過(guò),當(dāng)然會(huì)滯留一部分,再加上電化學(xué)吸附作用,液體損失量就相當(dāng)客觀了。國(guó)外研究表明,當(dāng)使用普通吸頭取液量小于2ml時(shí),因掛壁而導(dǎo)致的樣品損失平均超過(guò)20%,尤其是當(dāng)取用高粘稠度的試劑(如酶制劑等)時(shí),樣品損失量會(huì)更大。

2)預(yù)混反應(yīng)液體積減少:比如當(dāng)配制PCR反應(yīng)的mix時(shí),如果計(jì)劃做10個(gè)反應(yīng),我們一般都要按12個(gè)反應(yīng)的量配制才夠最終的分配。加樣槍不準(zhǔn)只是次要原因,主要原因就在于每次取樣時(shí)的液體損失。

3)樣品變性:具有長(zhǎng)線形結(jié)構(gòu)的大分子,如核酸和多肽等,其分子會(huì)纏繞或勾掛在管壁上,這是導(dǎo)致大分子降解變性的機(jī)械剪切力的主要原因,并且吸頭內(nèi)徑越小、吸打樣品的速度越快,其導(dǎo)致分子變性的作用就越強(qiáng)。 

三、金麥克產(chǎn)品的低吸附性

下圖是以200ml吸頭為例,對(duì)進(jìn)口品(Axygen)、國(guó)產(chǎn)品(海門(mén))和尤特萊博®產(chǎn)品的吸附性進(jìn)行的比較。 

關(guān)于圖1-3的說(shuō)明:

1、 本對(duì)比實(shí)驗(yàn)中取用的藍(lán)色液體為TaKaRa公司生產(chǎn)的rTaq酶套裝中配送的6×Loading buffer稀釋到的溶液。
2
、 實(shí)驗(yàn)方法:
  (1 對(duì)比1ml吸頭時(shí),各吸取750μl然后以同樣速度將加樣槍一次打到底,觀察液體在吸頭內(nèi)壁殘留情況;
 ?。?span lang="EN-US">2
 對(duì)比200μl吸頭時(shí),各吸取150μl然后以同樣速度將加樣槍一次打到底,觀察液體在吸頭內(nèi)壁殘留情況;
  (3 對(duì)比10μl吸頭時(shí),各吸取10μl然后以同樣速度將加樣槍一次打到底,觀察液體在吸頭內(nèi)壁殘留情況。
3
、 圖中I類制品為Axygen標(biāo)準(zhǔn)制品,II類制品為國(guó)產(chǎn)普通制品,III類制品為尤特萊博低吸附制品。

四、金麥克耗材是怎樣做成的

1、 原材料的選擇:選擇高品質(zhì)聚丙烯原料進(jìn)行生產(chǎn),加工過(guò)程中不添加廢料和回收料。

2、 標(biāo)準(zhǔn)硅化工藝:成熟的標(biāo)準(zhǔn)化工藝,賦予制品以真正光滑的表面,同時(shí)進(jìn)一步提高了化學(xué)穩(wěn)定性、 憎水性和介電系數(shù),從而極大提高了普通塑料制品的表面質(zhì)量。

3、 標(biāo)準(zhǔn)凈化工藝:多道無(wú)接觸工藝進(jìn)行的凈化處理,確保最終制成品不會(huì)攜帶RNase、DNasePyrogen。

4、 先進(jìn)的質(zhì)控體系:自主研發(fā)的半定量檢測(cè)塑料制品RNase活性的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)體系、半定量檢測(cè)塑料制品DNase活性的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)體系細(xì)菌內(nèi)毒素法檢測(cè)塑料制品熱原的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)體系保證了產(chǎn)品品質(zhì)和質(zhì)量的穩(wěn)定。

5、 分級(jí)小包裝運(yùn)輸:采用保護(hù)性很強(qiáng)的分級(jí)小包裝,有效防范運(yùn)輸和存放過(guò)程中因擠壓使包裝破損而導(dǎo)致的污染。

 質(zhì)  
   
無(wú)微生物污染
高溫/壓滅菌,或鈷源照射滅菌
無(wú)DNA污染
分級(jí)凈化處理
無(wú)DNA酶(DNase free)
無(wú)RNA酶(RNase free)
無(wú)熱原(Pyrogen < 0.05EU/ml)
低吸附
硅化處理

五、 常規(guī)塑料耗材的品質(zhì)缺陷有哪些:

實(shí)驗(yàn)類型
現(xiàn)  象
與耗材相關(guān)的原因
可能的解決方法
微量取樣
微量取樣時(shí)液體和樣品取樣不準(zhǔn)確,如混合液體積少于各組分體積之和
液體吸附在吸頭壁上不能完全打出
使用低吸附吸頭
微量樣品貯存
無(wú)法從管中完全吸取出樣品液體
液體樣品吸附在管壁上,無(wú)法吸出
使用低吸附離心管
RNA操作
RNA降解
吸頭或離心管攜帶RNA酶
使用經(jīng)凈化處理的RNase free耗材
PCR反應(yīng)(1)
模板較少時(shí)可能產(chǎn)生假陰性結(jié)果
模板DNA分子吸附在管壁上未參與反應(yīng)
使用低吸附PCR薄壁管
PCR反應(yīng)(2)
總是無(wú)法避免雜帶(或假陽(yáng)性)
吸頭或PCR管的DNA污染
使用經(jīng)凈化處理的無(wú)DNA污染耗材
內(nèi)切酶反應(yīng)
底物較少時(shí)可能產(chǎn)生假陰性結(jié)果
底物分子吸附在管壁上未參與反應(yīng)
使用低吸附反應(yīng)管
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