主要用途
FF微孔板使用固定在微孔板上的95個(gè)不同的生化試驗(yàn)來(lái)對(duì)廣泛的真菌（包含絲狀真菌及酵
母）提供表型概況并進(jìn)行鑒定。Biolog鑒定系統(tǒng)中的軟件（MicrologTM 3）通過(guò)讀取FF微孔板上
所表現(xiàn)出的表型圖譜來(lái)對(duì)真菌進(jìn)行鑒定。FF鑒定板適合鑒定新鮮的培養(yǎng)物，對(duì)于在斜面培養(yǎng)基
上長(zhǎng)久保存或經(jīng)過(guò)多次轉(zhuǎn)代的培養(yǎng)物，常會(huì)使表型惡化，或會(huì)失去該菌株的生理代謝特征。
概述
? Biolog FF微孔板通過(guò)微生物對(duì)微孔板中的不同碳源的利用及氧化情況進(jìn)行測(cè)試，測(cè)試
使得有特征代謝的孔變成紫色或者濁度發(fā)生改變，從而使微生物在測(cè)試板上顯示出“代
謝指紋圖譜”1，2。
? 所有必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及生化試劑都被預(yù)先填充、干化在96個(gè)孔中。利用碘硝基四唑
紫（Iodonitrotetrazolium Violet）作為顏色指示劑顯示利用特定碳源發(fā)生氧化反應(yīng)時(shí)線
粒體的活性。
?
試驗(yàn)的操作過(guò)程非常簡(jiǎn)單。在平板上按照常規(guī)方法劃線分離需要鑒定的微生物，然后
將分離的到的純種用棉簽挑到一種特殊的“凝膠”接種液（FF-IF）3，4中，配成指定
細(xì)胞濃度的菌懸液。將菌懸液按每孔100µl的量加到FF板，菌懸液通常包含孢子和菌
絲片斷。當(dāng)培養(yǎng)時(shí)，就會(huì)利用到孔中的碳源，會(huì)發(fā)生下列某一個(gè)或兩個(gè)變化：1，線粒
體活性增加，形成微紅-橙色顏色，在490nm處的光密度增加。2，細(xì)胞生長(zhǎng)，濁度增
加，同時(shí)在490nm和750nm處的光密度增加。A1 孔不含碳源，同時(shí)作為色度和濁度
的參照孔。
? 鑒定板一般孵育1-4天。利用MicroStation讀數(shù)儀在490nm和750nm定量檢測(cè)每孔的色
度和濁度反應(yīng) 。Biolog MicrologTM軟件通過(guò)FF板上顯顏色及濁度變化所產(chǎn)生的指紋圖
譜自動(dòng)與數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，尋找符合條件的結(jié)果。如果找到匹配的，所分離出來(lái)的微生物
得到鑒定
注意事項(xiàng)
為獲取準(zhǔn)確且可重復(fù)的結(jié)果，請(qǐng)務(wù)必遵循下列建議：
? 純培養(yǎng)是一切鑒定的前提，
? 使用專用培養(yǎng)基進(jìn)行活化培養(yǎng)非常重要，同一菌株可能會(huì)由于接種前在不同的培養(yǎng)基上生
長(zhǎng)而在鑒定時(shí)產(chǎn)生不同的代謝特征。
? 無(wú)菌操作，避免污染影響結(jié)果。
? 應(yīng)盡量使用一次性玻璃器皿來(lái)處理所有細(xì)胞懸液和其他溶液。已經(jīng)清洗過(guò)的玻璃器皿可能
含有微量的皂劑或洗滌劑，會(huì)影響到結(jié)果。
? 在使用前將FF微孔板及FF-IF接種液預(yù)熱到室溫。一些菌種對(duì)冷沖擊非常敏感。
? 準(zhǔn)確校正濁度儀，使菌懸液濃度位于指定的濃度范圍。請(qǐng)參考“接種液制備”這一部分內(nèi)
容。
? FF鑒定板上包被的化學(xué)物質(zhì)對(duì)溫度和光敏感。FF微孔板請(qǐng)置于2-8℃冰箱，避光保存。如
孔顏色為深褐色表示鑒定板碳源已變質(zhì)。一些孔本身就是黃色或淺紅色，這是正常的。
? 請(qǐng)一定采取安全的方式來(lái)處理所有真菌。盡量在無(wú)菌間操作，避免污染。尤其是要避免空
氣中的孢子（分生孢子）產(chǎn)生交叉污染。避免對(duì)儀器或人為的污染。推薦使用II級(jí)生物安全
柜。干凈、無(wú)菌的可替換鑒定板蓋有助于減少對(duì)MicroStation讀數(shù)儀的污染風(fēng)險(xiǎn)。
? 檢查 FF 鑒定板：
請(qǐng)勿使用過(guò)期的 FF 鑒定板。要將其帶著外包裝放于 2-8℃冰箱，避光保存。
北京
