主要用途
FF微孔板使用固定在微孔板上的95個不同的生化試驗來對廣泛的真菌（包含絲狀真菌及酵
母）提供表型概況并進行鑒定。Biolog鑒定系統(tǒng)中的軟件（MicrologTM 3）通過讀取FF微孔板上
所表現(xiàn)出的表型圖譜來對真菌進行鑒定。FF鑒定板適合鑒定新鮮的培養(yǎng)物，對于在斜面培養(yǎng)基
上長久保存或經(jīng)過多次轉(zhuǎn)代的培養(yǎng)物，常會使表型惡化，或會失去該菌株的生理代謝特征。
概述
? Biolog FF微孔板通過微生物對微孔板中的不同碳源的利用及氧化情況進行測試，測試
使得有特征代謝的孔變成紫色或者濁度發(fā)生改變，從而使微生物在測試板上顯示出“代
謝指紋圖譜”1，2。
? 所有必要的營養(yǎng)物質(zhì)以及生化試劑都被預先填充、干化在96個孔中。利用碘硝基四唑
紫（Iodonitrotetrazolium Violet）作為顏色指示劑顯示利用特定碳源發(fā)生氧化反應時線
粒體的活性。
?
試驗的操作過程非常簡單。在平板上按照常規(guī)方法劃線分離需要鑒定的微生物，然后
將分離的到的純種用棉簽挑到一種特殊的“凝膠”接種液（FF-IF）3，4中，配成指定
細胞濃度的菌懸液。將菌懸液按每孔100µl的量加到FF板，菌懸液通常包含孢子和菌
絲片斷。當培養(yǎng)時，就會利用到孔中的碳源，會發(fā)生下列某一個或兩個變化：1，線粒
體活性增加，形成微紅-橙色顏色，在490nm處的光密度增加。2，細胞生長，濁度增
加，同時在490nm和750nm處的光密度增加。A1 孔不含碳源，同時作為色度和濁度
的參照孔。
? 鑒定板一般孵育1-4天。利用MicroStation讀數(shù)儀在490nm和750nm定量檢測每孔的色
度和濁度反應 。Biolog MicrologTM軟件通過FF板上顯顏色及濁度變化所產(chǎn)生的指紋圖
譜自動與數(shù)據(jù)庫比對，尋找符合條件的結果。如果找到匹配的，所分離出來的微生物
得到鑒定
注意事項
為獲取準確且可重復的結果，請務必遵循下列建議：
? 純培養(yǎng)是一切鑒定的前提，
? 使用專用培養(yǎng)基進行活化培養(yǎng)非常重要，同一菌株可能會由于接種前在不同的培養(yǎng)基上生
長而在鑒定時產(chǎn)生不同的代謝特征。
? 無菌操作，避免污染影響結果。
? 應盡量使用一次性玻璃器皿來處理所有細胞懸液和其他溶液。已經(jīng)清洗過的玻璃器皿可能
含有微量的皂劑或洗滌劑，會影響到結果。
? 在使用前將FF微孔板及FF-IF接種液預熱到室溫。一些菌種對冷沖擊非常敏感。
? 準確校正濁度儀，使菌懸液濃度位于指定的濃度范圍。請參考“接種液制備”這一部分內(nèi)
容。
? FF鑒定板上包被的化學物質(zhì)對溫度和光敏感。FF微孔板請置于2-8℃冰箱，避光保存。如
孔顏色為深褐色表示鑒定板碳源已變質(zhì)。一些孔本身就是黃色或淺紅色，這是正常的。
? 請一定采取安全的方式來處理所有真菌。盡量在無菌間操作，避免污染。尤其是要避免空
氣中的孢子（分生孢子）產(chǎn)生交叉污染。避免對儀器或人為的污染。推薦使用II級生物安全
柜。干凈、無菌的可替換鑒定板蓋有助于減少對MicroStation讀數(shù)儀的污染風險。
? 檢查 FF 鑒定板：
請勿使用過期的 FF 鑒定板。要將其帶著外包裝放于 2-8℃冰箱，避光保存。
北京
