草莓视频app下载安装无限看免费,精品国产福利在线视频

產(chǎn)品名稱: PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Erase
產(chǎn)品貨號(hào):RR047A
產(chǎn)品規(guī)格:20 μl反應(yīng)×100 次
產(chǎn)品品牌:Takara
供應(yīng)商:
產(chǎn)品產(chǎn)地: 日本產(chǎn)品價(jià)格:￥詢價(jià)
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū):

　　　　　北京　北京

保存于運(yùn)輸說(shuō)明：
-20℃

詳細(xì)信息：

■ 制品內(nèi)容 (20 μl反應(yīng)×100次量)

1. gDNA Eraser	100 μl
2. 5×gDNA Eraser Buffer*1	200 μl
3. PrimeScript RT Enzyme Mix I*2	100 μl
4. 5×PrimeScript Buffer 2(for Real Time)*3	400 μl
5. RT Primer Mix*4	400 μl
6. RNase Free H2O	1 ml×2
7. EASY Dilution (for Real Time PCR)*5	1 ml

1 5×gDNA Eraser Buffer在反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)前使用，請(qǐng)務(wù)必進(jìn)行基因組DNA的除去反應(yīng)。 2 含有RNase Inhibitor。 3 含有dNTP Mixture。 4 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers。 *5 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)梯度稀釋cDNA或RNA標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液。模板DNA或RNA如果用水或TE Buffer稀釋時(shí)，由于受Microtube吸附作用等的影響，往往不能準(zhǔn)確地進(jìn)行稀釋，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果精度降低。使用本制品時(shí)，即使稀釋至低濃度也能夠進(jìn)行準(zhǔn)確地稀釋，容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。EASY Dilution也可以單獨(dú)購(gòu)買 (Code No.: 9160)。注意：EASY Dilution請(qǐng)與本公司Real Time PCR試劑組合使用，對(duì)于其他公司的同類制品的適用性本公司尚未進(jìn)行確認(rèn)。

■ 制品說(shuō)明

為了準(zhǔn)確地進(jìn)行基因表達(dá)量分析，必須滿足只有cDNA作為模板檢出的先決條件，但Total RNA中常常混有基因組DNA，并可以直接作為PCR反應(yīng)的模板進(jìn)行擴(kuò)增，因此會(huì)造成解析結(jié)果不準(zhǔn)確。為了避免這種情況發(fā)生，通常將檢測(cè)用引物設(shè)計(jì)在內(nèi)含子前后的外顯子上，使基因組DNA得不到擴(kuò)增。但是，此方法不適合具有單個(gè)外顯子的基因或兩個(gè)外顯子之間所跨的內(nèi)含子過(guò)小的基因，同時(shí)當(dāng)基因組上有偽基因存在時(shí)、或設(shè)計(jì)引物對(duì)基因組有非特異性擴(kuò)增時(shí)、以及基因信息沒(méi)被完全解析的生物種等也同樣不適合于本方法。在這種情況下，我們常常需要對(duì)Total RNA樣品進(jìn)行DNase I處理，以除去殘存的基因組DNA。而DNase I處理通常要進(jìn)行復(fù)雜的純化操作，同時(shí)會(huì)造成RNA的降解和損失。
PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因組DNA進(jìn)行Real Time RT-PCR反應(yīng)的專用反轉(zhuǎn)錄試劑。Kit中使用了具有較強(qiáng)DNA分解活性的gDNA Eraser，通過(guò)42℃，2 min即可除去基因組DNA。同時(shí)由于反轉(zhuǎn)錄試劑中含有抑制DNA分解酶活性的組分，經(jīng)過(guò)gDNA Eraser處理后的樣品可以直接進(jìn)行15 min的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成cDNA，因此，20 min內(nèi)即可迅速完成從基因組DNA去除到cDNA合成的全過(guò)程。
使用本制品合成的cDNA適用于SYBR^® Green分析法和TaqMan®探針?lè)治龇ǎ梢愿鶕?jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，選擇與SYBR^® Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)、Premix Ex Taq (Probe qPCR) 等定量試劑組合使用。
注意：Takara Bio使用SYBR^® Green I 作為研究試劑已得到Molecular Probes Inc.的許可。SYBR^®為 Molecular Probes Inc.的注冊(cè)商標(biāo)。

■ 保存

-20℃。

■ 試劑盒特長(zhǎng)

1. 含有去除基因組DNA的gDNA Eraser，只需2 min即可除去基因組DNA。
2. 只需15 min即可高效合成Real Time PCR反應(yīng)用模板cDNA，是進(jìn)行2 Step Real Time RT-PCR反應(yīng)的******試劑。
3. 反轉(zhuǎn)錄引物使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer混合的RT Primer Mix，可以均勻合成樣品中的各種cDNA。
4. 本制品提供了SYBR Green^®分析法和TaqMan^®探針?lè)治龇ǜ髯宰钸m反應(yīng)體系，可以根據(jù)分析方法選擇體系。?
(1) 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中RT Primer Mix的用量。 ?
(2) 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中總RNA的用量。

5. Real Time RT PCR定量需要建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的條件就是需要將總RNA和反轉(zhuǎn)錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用

水或TE Buffer稀釋時(shí)，由于模板濃度低不穩(wěn)定，因而會(huì)縮小曲線范圍，結(jié)果精度降低。本制品中附加了標(biāo)準(zhǔn)曲線制作用稀釋液

EASY Dilution (for Real Time PCR) ，將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時(shí)也能夠進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋，容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確

定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

■ 注意事項(xiàng)

1. 當(dāng)同時(shí)需要進(jìn)行數(shù)次反應(yīng)時(shí)，應(yīng)先配制各種試劑的混合液 (Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等)，然后再

分裝到每個(gè)反應(yīng)管中。這樣可使所取的試劑體積更準(zhǔn)確，減少試劑損失，避免重復(fù)分取同一試劑。同時(shí)也可以減少實(shí)驗(yàn)操作或

實(shí)驗(yàn)之間產(chǎn)生的誤差。

2. gDNA Eraser和PrimeScript^® RT Enzyme Mix I 在使用前要小心地離心收集到反應(yīng)管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油，

粘度高，分取時(shí)應(yīng)慢慢吸取。同時(shí)，要使用精確、量程適合的移液槍，并且不要使Tip插入液面過(guò)深，否則會(huì)因Tip壁粘著造成

損失，而使酶量不足。

3. 5×gDNA Eraser Buffer和5×PrimeScript Buffer 2 (for Real Time) 在使用前需Vortex輕輕離心。
4. 分裝試劑時(shí)務(wù)必使用新的槍頭 (Tip)，以防止樣品間污染。