LDH/死細(xì)胞檢測/細(xì)胞毒性檢測
Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST®是通過測定細(xì)胞釋放到培養(yǎng)基中的乳酸脫氫酶(LDH)活性進(jìn)而測定細(xì)胞損害的試劑盒。LDH(乳酸脫氫酶)是存在于細(xì)胞質(zhì)的一種酶,當(dāng)細(xì)胞膜受到損傷時(shí),LDH 會(huì)釋放到培養(yǎng)基中。由于釋放出的LDH 穩(wěn)定,檢測培養(yǎng)基中LDH 的量可以作為測定死細(xì)胞和受損細(xì)胞數(shù)量的指標(biāo)。
本試劑盒可以測定受損細(xì)胞所釋放出的LDH,其原理是LDH 催化乳酸生成丙酮酸和NADH,NADH 通過電子載體可將水溶性四唑鹽WST®(無色)還原成甲臜產(chǎn)物(橙色),WST®甲臜產(chǎn)物的吸光度與LDH 的量呈正比,利用此原理可以測定死細(xì)胞和受損細(xì)胞的數(shù)量。
本試劑盒中試劑不會(huì)和活細(xì)胞反應(yīng),而且對(duì)細(xì)胞無損害,可以直接添加到含有細(xì)胞的培養(yǎng)基中檢測(一步法)。也可以分離細(xì)胞后,加到培養(yǎng)基中檢測( 低損傷法,分離的細(xì)胞可以做其他實(shí)驗(yàn))。本試劑盒采用穩(wěn)定性高的WST®,配置后的溶液可以長時(shí)間保存,不需要現(xiàn)配現(xiàn)用,適用于高通量篩選。